松香基三唑衍生物合成与生物活性研究
这是一篇关于脱氢枞酸,1,2,4-三唑衍生物,抗真菌活性,作用机制的论文, 主要内容为农作物病、虫、草害病疫泛滥对于粮食生产造成巨大损失,传统化学农药虽然操作简单、见效快,然而传统化学农药的滥用污染环境、破坏生态、农业害物产生抗药性,最终威胁粮食安全,因此亟需开发具有广谱、高效的植物源农药。松香作为松树次生代谢产物,具有储量丰富、环境相容性好、细胞毒性低和生物活性广泛的优势,但松香本身易氧化导致其化学成份并不稳定,因此如何克服松香自身缺陷,设计开发高效创新、环境友好的松香基药剂分子具有极其重要的意义。本文以脱氢枞酸为先导化合物,对其羧基进行改性修饰,设计合成脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚和脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类衍生物,并测试目标化合物的抗真菌、杀虫和除草活性,分析目标化合物分子结构和农用活性之间的构效关系。通过生理生化指标测试和分子对接,初步探究脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类化合物对苹果腐烂真菌的作用机制,以期指导下一步脱氢枞基药剂分子的合成及其抗真菌机制研究。具体研究结果如下:(1)以脱氢枞酸为先导化合物,通过酰氯化,亲核取代和耦合环化等多步反应设计合成27个结构新颖的脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚类衍生物,通过柱层析法对目标化合物进行分离纯化(V石油醚:V乙酸乙酯=10:1),产率为60-70%;采用“一锅法”和醛胺缩合反应设计合成22个未见文献报道的脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类衍生物;通过柱层析法对目标化合物进行分离纯化(V石油醚:V乙酸乙酯=10:1),产率为60-70%;利用FT-IR、1H NMR、13C NMR和LC-MS对目标化合物进行结构表征。(2)采用菌丝生长速率法测试两类脱氢枞基1,2,4-三唑衍生物对水稻纹枯等7种植物真菌的体外抗真菌活性。结果表明:改性后的脱氢枞基1,2,4-三唑类衍生物可显著提高脱氢枞酸的农用活性,且该类化合物对苹果腐烂真菌具有较好的抑制效果。其中脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚类化合物5h-1对苹果腐烂真菌具有较好的抑制活性(EC50=9.673μg/m L),略低于阳性对照氟康唑(EC50=4.689μg/m L);脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类化合物3d、3f、3i、4c、4d对苹果腐烂真菌均有较好的抑制效果,其EC50分别为0.958μg/m L、0.537μg/m L、0.695μg/m L、1.023μg/m L和1.356μg/m L,远高于阳性对照氟康唑,远高于先导化合物脱氢枞酸(EC50远大于100μg/m L);体内活性测试结果表明:化合物3f在100、50和25μg/m L的浓度下具有较好的保护效果,其保护值分别为92.16%,84.57%和61.57%。此外,化合物5h-3在100μg/m L的浓度下能完全抑制稗草的生长,而化合物3g、3i、3j、4b和4d在200μg/m L的浓度下对孑孓具有较好的杀灭效果,48 h内矫正死亡率分别为96.63%、95.88%、90.00%、92.59%和92.59%,这些化合物可作为潜在农药候选物用于农作物可持续保护,值得进一步设计和开发。(3)采用扫描和透射电镜,观察化合物3f处理前后苹果腐烂真菌菌丝超微结构变化;利用激光共聚焦显微镜,探究化合物3f处理前后菌丝体内ROS累计、细胞核和线粒体膜电位变化;通过电导率实验和麦角甾醇含量测定,表征化合物3f对细胞膜的破坏程度;借助CYP51、SOD、POD、CAT酶活性测试,测试化合物3f对上述防御酶的活性影响;采用分子对接技术,进一步揭示化合物3f和靶蛋白之间的结合方式。实验结果表明:化合物3f处理苹果腐烂真菌能显著引起CYP51、SOD和CAT酶活性降低,这是因为化合物3f与CYP51(-11.18 kcal/mol)、SOD(-9.25 kcal/mol)和CAT(-8.79kcal/mol)之间存在较强的结合力,其中化合物3f与脯氨酸、缬氨酸成疏水作用,与组氨酸、精氨酸形成氢键,进而破坏CYP51、SOD、CAT的空间结构,导致菌丝内部ROS的累计、阻断苹果腐烂真菌麦角甾醇的形成,破坏菌丝体的超微结构,最终引起苹果腐烂真菌的死亡。综上,改性后的松香基衍生物能显著提升松香的农用活性,上述研究可为提高松香的高附加值,拓宽森林生物质资源利用,保障我国粮食安全,提供借鉴和参考价值。
社交电商信息内容对消费者感知风险的影响研究
这是一篇关于社交电商,信息内容,感知风险,信息传播,作用机制的论文, 主要内容为以社交网络为平台、以社会化商务为目的电商形态逐渐占据消费者市场,满足消费者越来越多元化的需求。但目前社交电商也面临内容同质化、用户感知风险过高等问题,这是社交电商领域待探讨的关键问题。因此,为挖掘社交电商信息内容对消费者感知风险的影响关系及内在机理,本研究利用理论与数据展开验证,总结出影响因素及路径,从而帮助政策制定者与社交电商平台方更好地通过构建社交电商信息内容生成、传播系统等相应措施,以降低消费者的感知风险水平。本研究首先通过文献回顾,对社交电商、信息内容、感知风险等范畴做出了定义;其次在消费者购买理论与信息传播的相关理论基础上,针对社交电商消费者群体推导信息内容与感知风险两大类变量间的关系;然后通过质性研究、深入访谈,以扎根理论方法提取出感知风险的影响因素,从而构建初步的理论分析框架,由此给出系列假设从而建立整合模型;再次通过较小样本预调查来修正问卷,并完成大范围正式调研的数据采集;随之借助SPSS22.0和AMOS23.0软件,对所采集的数据完成实证检验;最后比较预先假设与数据结论的差异,总结出本研究的实证结论:(1)社交电商消费者群体总体感知较高,在不同人口学特征上有显著差异;(2)完整性、专业性分别对功能风险、财务风险与隐私风险形成负向影响;相关性、原创性分别对功能风险、财务风险形成负向影响;知名度对财务风险、隐私风险形成负向影响;互动性对功能风险、隐私风险形成负向影响;评论数量对财务风险、评论质量对功能风险、评论时效性对隐私风险分别形成负向影响。(3)产品涉入度对完整性与功能风险、财务风险、隐私风险有调节作用;对相关性与功能风险、原创性与功能风险、财务风险有调节作用。(4)同质性对专业性与功能风险、财务风险、隐私风险有调节作用;对知名度与财务风险、隐私风险、互动性与功能风险有调节作用。社交电商平台和信息来源者应及时开发、更新、充实产品资讯内容,确保产品讯息的原创性,关注用户的真实动机与需求,发现减少消费者认知风险的重要要素。信息来源者还应该努力提升专业度和扩大知名度,以促进用户互动,形成良好的社交氛围。最后,社交电商平台还应注意到评论口碑的重要性,要引导已购消费者进行积极评论、表达使用体验、及时回复问题,为其他未购消费者的购买决策提供参考意见。
基于多组学探析二至丸干预自然衰老模型大鼠的作用机制研究
这是一篇关于自然衰老模型,二至丸,延缓衰老,肠道菌群,转录组学,代谢组学,代谢通路,作用机制的论文, 主要内容为目的:本实验以自然衰老模型大鼠为研究对象,系统评估不同剂量二至丸(Erzhi Pill,EZP)的延缓衰老作用,从“微生物-基因-分子”多组学角度阐释二至丸延缓衰老的生物学基础与作用机制,为二至丸的临床使用及开发提供理论依据。方法:1.二至丸对自然衰老模型大鼠的延缓衰老作用评价建立50只自然衰老大鼠模型,随机分为5组,分别为衰老模型组(K,n=10),二至丸低(EL,n=11)、中(EM,n=10)、高(EH,n=11)剂量组和金匮肾气丸组(J,n=8)。SD大鼠饲养至21月龄时给予药物干预,衰老模型组给予普通饲料喂养,二至丸低、中、高剂量组大鼠分别给予4%、8%、16%二至丸含药饲料,金匮肾气丸组(JSP)大鼠给予4.4%的金匮肾气丸含药饲料,每只20 g×d-1,连续喂养90 d。另取6月龄SD大鼠作为青年对照组(Q,n=8),6周龄SD大鼠为幼年对照组(Y,n=10),给予普通饲料。通过观察二至丸对自然衰老模型大鼠的一般体征、体成分的变化、抗氧化指标和端粒长度等影响,初步评价二至丸对自然衰老模型大鼠的延缓衰老作用。2.二至丸对自然衰老模型大鼠肠道菌群的影响对大鼠盲肠内容物进行16S r RNA V3-V4区序列检测,通过结果解析自然衰老模型大鼠的肠道菌群多样性,进一步观察在门和属分类水平上差异菌的相对丰度变化,采用功能预测分析和网络分析对差异菌属的功能和相互作用进行深入探析。3.基于肝脏转录组学研究二至丸延缓衰老的作用机制采用RNA-seq测序技术进行转录组分析,首先提取大鼠肝组织的总RNA进行质检,用于创建RNA文库后进行上机检测。利用序列数据的表达量筛选出各组之间的差异表达基因(筛选条件为P-value<0.05且|log2FC|≥1),并对其进行基因本体论注释分析和KEGG通路富集分析,深入探析二至丸延缓衰老的差异表达基因与生物功能通路。为验证RNA测序数据与真实情况的相近程度,根据基因的表达量及其功能通路选取部分差异基因进行q RT-PCR验证。4.基于血浆代谢组学研究二至丸延缓衰老的作用机制利用UPLC-QTOF-MS/MS对自然衰老模型大鼠的血浆样品进行代谢组学分析,通过非监督主成分分析和正交偏最小二乘判别分析筛选数据,将VIP大于1且P<0.05的物质定义为差异代谢物,结合KEGG代谢通路分析。进一步联合多组学分析筛选出关键通路,从物质代谢角度探析二至丸延缓衰老作用机制。结果:1.二至丸对自然衰老模型大鼠的延缓衰老的作用评价(1)一般体征观察:观察发现,与Q、Y组相比,K组出现了体重下降、自主活动明显减少、精神萎靡、背部皮肤松弛、背毛卷曲枯黄无光泽、脱毛加速等明显的衰老症状。药物干预后,与K组比较,各给药组大鼠衰老症状均有不同程度地缓解,初步表明EZP具有一定程度的延缓衰老的作用。(2)衰老大鼠的体质量变化:结果表明各组大鼠体质量组间无统计学意义(P>0.05),说明在本实验中EZP对自然衰老模型大鼠的体质量未造成明显影响。但K组大鼠的体质量随着年龄增长而减小,而EZP各给药组的体质量均有一定程度的回升趋势。(3)Kaplan-Meier生存曲线:结果表明,长达90天的EZP干预可以使自然衰老模型大鼠的存活率呈增加趋势,但无显著性差异。(4)体成分分析:利用生物阻抗频谱进行体成分检测发现,随着大鼠年龄增长,大鼠的TBW呈现下降趋势,ECF占比呈上升趋势,ICF占比随之出现下降趋势,且呈现FM占比上升而FFM占比下降的趋势。与Y比较,EH组的TBW和FFW明显下降,FM增加(P<0.05);与K比较,各组无统计学意义。(5)脏器指数结果:与Y组大鼠的胸腺和脾脏指数比较,Q、K、EL、EM、EH和J组的胸腺和脾脏指数均极显著下降(P<0.001)。与K组比较,各不同给药浓度的EZP对自然衰老模型大鼠的胸腺和脾脏指数均有上升的趋势且呈现剂量依赖性,但无统计学差异。采用非参数检验,与Y组肝脏指数比较,Q、K、EL、EH、J组肝脏指数显著下降(调整后P<0.05),其它组之间的差异无统计学意义。与K组的肝脏指数相比,各组间未见显著性差异。与Y组肾脏指数比较,K、EL、EH和J组的肾脏指数显著降低(调整后P<0.05)。EZP低、中、高剂量组和J组的肾脏指数与老年模型组相比无显著性差异。(6)肝肾组织HE染色结果:与Y组和Q组相比,K组大鼠的肾小球体积略小,肾小囊囊腔明显增大,肾小管管腔扩张伴上皮细胞空泡变性、坏死脱落。EL、EM组部分肾小管肿胀,且伴随上皮细胞损伤脱落,EH组少量肾小管上皮细胞损伤。J组部分细胞排列疏松,肾小管肿胀、扩张伴上皮细胞坏死脱落;各组大鼠肝脏组织HE染色结果未见明显的肝组织病理性变化。(7)血细胞检测结果:与K组对比各组白细胞数、红细胞数、血小板数、红细胞比容和血红蛋白水平均无显著差异(P>0.05)。(8)肝脏抗氧化指标检验:与Y组比较,K组大鼠丙二醛(MDA)含量极显著增加(P<0.001);与K组比较,EZP给药后能够使MDA的含量降低,特别是EH组能够显著下调自然衰老模型大鼠的MDA水平(P<0.05);同时,J组也能使老年大鼠的MDA水平下降,但差异未有明显的统计学意义。随着大鼠年龄增加,超氧化物歧化酶(SOD)活力水平有下降趋势,与K组相比,EZP各剂量组和J组SOD活力水平显现上升趋势,但未达到统计学差异。(9)肝脏端粒长度测定:随着年龄增长,衰老大鼠端粒长度逐渐下降,EZP给药后有回升的趋势,并呈现剂量依赖性。端粒长度的分布在EL组-Y组(调整后P=0.028)、EL组-Q组(调整后P=0.001)的差异有统计学意义,其它组之间的差异无统计学意义。2.二至丸对自然衰老模型大鼠肠道菌群的影响(1)Alpha多样性分析表明,除EM组和Y组微生物群落多样性显著高于K组外(P<0.05),其他各组样本的物种Shannon指数无显著差异;EM、EH和Y组的Simpson指数均高于K组(P<0.05);与K组比较,EM、EH、J、Q、Y组的Chao指数和Ace指数显著减低(P<0.05)。(2)在门水平上,各组大鼠肠道菌群以Firmicutes为主,其次是Bacteroidota和Actinobacteriota。(3)在属水平上,与K组比较,EL组和EH组的Romboutsia丰度显著下降(P<0.05),EM组虽然有下降趋势但差异不显著;EL组和EH组的norank_f__norank_o__Clostridia_UCG-014丰度显著下降(P<0.05),EM组有下降趋势但无显著性差异;EL、EM和EH组的Clostridium_sensu_stricto_1丰度均显著下降(P<0.05);EL、EM组的Allobaculum显著上升(P<0.05),EH组有上升趋势但差异不显著;EL、EM和EH组的UCG-005显著上升(P<0.05);EL、EM和EH组的norank_f__Eubacterium_coprostanoligenes_group显著上升(P<0.05)。(4)COG功能预测涉及碳水化合物、氨基酸及能量代谢,癌症,免疫疾病以及细胞生长和死亡等微生物基因,但主要集中于代谢相关的微生物基因。3.基于肝脏转录组学研究二至丸延缓衰老的作用机制本实验对68个肝脏样品进行转录组测序分析,测序得到531.31 Gb clean data,碱基质量值为30时,正确率在93.62%以上。差异表达基因结果表明,与K组比较,Y组共1687个差异表达基因(DEGs),其中上调DEGs1010个,下调677个;Q组总计590个DEGs,其中上调403个,下调187个;EL组共36个DEGs,其中上调30个、下调6个;EM组总计10个DEGs,上调5个,下调5个;EH组共242个DEGs,其中上调199个,下调43个;J组共34个DEGs,上调18个,下调16个。与K组比较,Y组在类固醇生物合成(Steroid biosynthesis)途径中富集程度最高;Q组在昼夜节律通路(Circadian rhythm)的富集程度最高;EL组在谷胱甘肽代谢(glutathione metabolic pathway)通路上的富集程度最高;EM、EH组在昼夜节律通路富集程度最高;J组初级胆汁酸的生物合成(primary bile acid biosynthesis)通路具有高富集率。q RT-PCR验证的差异基因的表达结果与转录组一致。4.基于血浆代谢组学研究二至丸延缓衰老的作用机制经代谢组学分析,获取幼年大鼠与老年大鼠血浆样本中的生物标志物45个,富集代谢通路11条;EZP高剂量干预自然衰老大鼠血浆样本的19个差异化合物富集得到9条生物通路;金匮肾气丸干预自然衰老大鼠后的25个差异化合物主要富集在7条生物通路。EZP和金匮肾气丸共同显著回调8个差异代谢物质:褪黑激素(Melatonin radical)、肌醇1,4,5—三磷酸(myo-Inositol 1,4,5-trisphosphate)、廿四碳六烯酸(Tetracosahexaenoic acid)、乙酰磷酸(Acetylphosphate)、甘油二酸酯(DG(15:0/0:0/18:4n3))、尿胆素原(Urobilinogen)、溶血PC(Lyso PC(22:4(7Z,10Z,13Z,16Z)/0:0))、中胆红素原(Mesobilirubinogen),共同参与丙酮酸代谢、卟啉和叶绿素代谢、磷酸肌醇代谢、甘油磷脂代谢、磷脂酰肌醇信号系统生物代谢通路。结论:1.EZP能够缓解自然衰老模型大鼠的衰老症状,提高存活率,并可能通过改善自然衰老模型大鼠免疫功能、抗氧化能力和端粒长度起到延缓衰老的作用且呈剂量依赖性,其中EZP高剂量作用效果较为明显。2.EZP可能改变自然衰老大鼠肠道菌群的结构组成和丰度比例发挥延缓衰老作用,其中高剂量调节肠道菌群延缓衰老效果最佳。3.EZP可能通过上调基因Nr1d1、Hsd17b2、Efna1、Xbp1,下调基因Cdkn1a、Gstt3、Insig1、Lpin1、Tsku、Dpt从而发挥延缓衰老作用,调节自然衰老模型大鼠的癌症通路、昼夜节律通路、PI3K-Akt信号转导等代谢相关通路发挥其延缓衰老的作用,JSP则可能通过初级胆汁酸的生物合成通路发挥延缓衰老作用。4.EZP可能通过作用于视黄醇代谢、丙酮酸代谢、半乳糖代谢、磷脂酰肌醇信号系统、磷酸肌醇代谢、卟啉和叶绿素代谢、甘油磷脂代谢、氨基糖和核苷酸糖等代谢通路发挥其延缓衰老作用,且滋阴方EZP和补阳方JSP可通过多途径调节衰老相关通路发挥延缓衰老作用。5.多组学的联合分析提示EZP给药后的自然衰老大鼠肠道微生物群与宿主代谢密切相关,组学联合的关键通路是昼夜节律通路、PI3K-Akt信号通路和糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路。
社交电商信息内容对消费者感知风险的影响研究
这是一篇关于社交电商,信息内容,感知风险,信息传播,作用机制的论文, 主要内容为以社交网络为平台、以社会化商务为目的电商形态逐渐占据消费者市场,满足消费者越来越多元化的需求。但目前社交电商也面临内容同质化、用户感知风险过高等问题,这是社交电商领域待探讨的关键问题。因此,为挖掘社交电商信息内容对消费者感知风险的影响关系及内在机理,本研究利用理论与数据展开验证,总结出影响因素及路径,从而帮助政策制定者与社交电商平台方更好地通过构建社交电商信息内容生成、传播系统等相应措施,以降低消费者的感知风险水平。本研究首先通过文献回顾,对社交电商、信息内容、感知风险等范畴做出了定义;其次在消费者购买理论与信息传播的相关理论基础上,针对社交电商消费者群体推导信息内容与感知风险两大类变量间的关系;然后通过质性研究、深入访谈,以扎根理论方法提取出感知风险的影响因素,从而构建初步的理论分析框架,由此给出系列假设从而建立整合模型;再次通过较小样本预调查来修正问卷,并完成大范围正式调研的数据采集;随之借助SPSS22.0和AMOS23.0软件,对所采集的数据完成实证检验;最后比较预先假设与数据结论的差异,总结出本研究的实证结论:(1)社交电商消费者群体总体感知较高,在不同人口学特征上有显著差异;(2)完整性、专业性分别对功能风险、财务风险与隐私风险形成负向影响;相关性、原创性分别对功能风险、财务风险形成负向影响;知名度对财务风险、隐私风险形成负向影响;互动性对功能风险、隐私风险形成负向影响;评论数量对财务风险、评论质量对功能风险、评论时效性对隐私风险分别形成负向影响。(3)产品涉入度对完整性与功能风险、财务风险、隐私风险有调节作用;对相关性与功能风险、原创性与功能风险、财务风险有调节作用。(4)同质性对专业性与功能风险、财务风险、隐私风险有调节作用;对知名度与财务风险、隐私风险、互动性与功能风险有调节作用。社交电商平台和信息来源者应及时开发、更新、充实产品资讯内容,确保产品讯息的原创性,关注用户的真实动机与需求,发现减少消费者认知风险的重要要素。信息来源者还应该努力提升专业度和扩大知名度,以促进用户互动,形成良好的社交氛围。最后,社交电商平台还应注意到评论口碑的重要性,要引导已购消费者进行积极评论、表达使用体验、及时回复问题,为其他未购消费者的购买决策提供参考意见。
松香基三唑衍生物合成与生物活性研究
这是一篇关于脱氢枞酸,1,2,4-三唑衍生物,抗真菌活性,作用机制的论文, 主要内容为农作物病、虫、草害病疫泛滥对于粮食生产造成巨大损失,传统化学农药虽然操作简单、见效快,然而传统化学农药的滥用污染环境、破坏生态、农业害物产生抗药性,最终威胁粮食安全,因此亟需开发具有广谱、高效的植物源农药。松香作为松树次生代谢产物,具有储量丰富、环境相容性好、细胞毒性低和生物活性广泛的优势,但松香本身易氧化导致其化学成份并不稳定,因此如何克服松香自身缺陷,设计开发高效创新、环境友好的松香基药剂分子具有极其重要的意义。本文以脱氢枞酸为先导化合物,对其羧基进行改性修饰,设计合成脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚和脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类衍生物,并测试目标化合物的抗真菌、杀虫和除草活性,分析目标化合物分子结构和农用活性之间的构效关系。通过生理生化指标测试和分子对接,初步探究脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类化合物对苹果腐烂真菌的作用机制,以期指导下一步脱氢枞基药剂分子的合成及其抗真菌机制研究。具体研究结果如下:(1)以脱氢枞酸为先导化合物,通过酰氯化,亲核取代和耦合环化等多步反应设计合成27个结构新颖的脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚类衍生物,通过柱层析法对目标化合物进行分离纯化(V石油醚:V乙酸乙酯=10:1),产率为60-70%;采用“一锅法”和醛胺缩合反应设计合成22个未见文献报道的脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类衍生物;通过柱层析法对目标化合物进行分离纯化(V石油醚:V乙酸乙酯=10:1),产率为60-70%;利用FT-IR、1H NMR、13C NMR和LC-MS对目标化合物进行结构表征。(2)采用菌丝生长速率法测试两类脱氢枞基1,2,4-三唑衍生物对水稻纹枯等7种植物真菌的体外抗真菌活性。结果表明:改性后的脱氢枞基1,2,4-三唑类衍生物可显著提高脱氢枞酸的农用活性,且该类化合物对苹果腐烂真菌具有较好的抑制效果。其中脱氢枞基1,2,4-三唑硫醚类化合物5h-1对苹果腐烂真菌具有较好的抑制活性(EC50=9.673μg/m L),略低于阳性对照氟康唑(EC50=4.689μg/m L);脱氢枞基1,2,4-三唑席夫碱类化合物3d、3f、3i、4c、4d对苹果腐烂真菌均有较好的抑制效果,其EC50分别为0.958μg/m L、0.537μg/m L、0.695μg/m L、1.023μg/m L和1.356μg/m L,远高于阳性对照氟康唑,远高于先导化合物脱氢枞酸(EC50远大于100μg/m L);体内活性测试结果表明:化合物3f在100、50和25μg/m L的浓度下具有较好的保护效果,其保护值分别为92.16%,84.57%和61.57%。此外,化合物5h-3在100μg/m L的浓度下能完全抑制稗草的生长,而化合物3g、3i、3j、4b和4d在200μg/m L的浓度下对孑孓具有较好的杀灭效果,48 h内矫正死亡率分别为96.63%、95.88%、90.00%、92.59%和92.59%,这些化合物可作为潜在农药候选物用于农作物可持续保护,值得进一步设计和开发。(3)采用扫描和透射电镜,观察化合物3f处理前后苹果腐烂真菌菌丝超微结构变化;利用激光共聚焦显微镜,探究化合物3f处理前后菌丝体内ROS累计、细胞核和线粒体膜电位变化;通过电导率实验和麦角甾醇含量测定,表征化合物3f对细胞膜的破坏程度;借助CYP51、SOD、POD、CAT酶活性测试,测试化合物3f对上述防御酶的活性影响;采用分子对接技术,进一步揭示化合物3f和靶蛋白之间的结合方式。实验结果表明:化合物3f处理苹果腐烂真菌能显著引起CYP51、SOD和CAT酶活性降低,这是因为化合物3f与CYP51(-11.18 kcal/mol)、SOD(-9.25 kcal/mol)和CAT(-8.79kcal/mol)之间存在较强的结合力,其中化合物3f与脯氨酸、缬氨酸成疏水作用,与组氨酸、精氨酸形成氢键,进而破坏CYP51、SOD、CAT的空间结构,导致菌丝内部ROS的累计、阻断苹果腐烂真菌麦角甾醇的形成,破坏菌丝体的超微结构,最终引起苹果腐烂真菌的死亡。综上,改性后的松香基衍生物能显著提升松香的农用活性,上述研究可为提高松香的高附加值,拓宽森林生物质资源利用,保障我国粮食安全,提供借鉴和参考价值。
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